植物总RNA快速提取试剂盒

产品货号：

GS0088

中文名称：

植物总RNA快速提取试剂盒

英文名称：

Plant Total RNA Isolation Kit

产品规格：

50次|100次

发货周期：

1～3天

产品价格：

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本试剂盒适用于各种植物样品RNA的快速提取，操作简单、使用方便，提取的总RNA可用于Northern blot、Dot blot、poly A筛选、体外翻译、RNase保护分析和分子克隆。

植物含有多糖、多酚等次生代谢产物，这些物质在细胞裂解后可与RNA紧密结合形成难溶复合物或胶冻状沉淀，很难将其去除。本公司针对这一难题推出了试剂盒，

产品特点

操作简单，全过程可在40分钟内完成。
RNA得率高，完整性好。
适用于多糖、多酚物质含量较高的样品。

组分	50次	100次
Buffer Rlysis-P	35mL	70mL
Buffer PCA	5mL	10mL
DEPC-treated ddH2O	2.5mL	5mL

保存：4℃

自备试剂：氯仿、酚:氯仿（体积比为25:24，pH4.5）、无水乙醇、75%乙醇等。
提前将水浴锅调至65℃备用。
Buffer Rlysis-P在低温下可能产生沉淀，使用前请检查，如有沉淀，请先于65℃溶解，冷却至常温后使用。

取600μL Buffer Rlysis-P加入1.5mL RNase-free的离心管中备用。
取25～50mg植物组织用液氮研磨成粉末，加到上述1.5mL离心管中，立即震荡混匀。
- 液氮研磨过程中要避免样品融化，使用的研钵与药匙等工具应事先用液氮预冷。研磨后的样品应迅速加入裂解液中震荡混匀，避免RNA降解。
- 样品转入离心管时避免带入液态氮，因为液氮在封闭的离心管中迅速转变成气体可能引起离心管的爆裂，请注意安全。
65℃水浴5min使样品完全裂解。
向裂解样品中加入60μL Buffer PCA，充分混匀。-20℃放置3min。
室温12000rpm 4℃离心5min，取上清。
向上清液中加入等体积酚:氯仿（体积比为25:24，pH4.5），混匀。12000rpm 4℃离心5min，取上清液。
向上清液中加入等体积氯仿，混匀。12000rpm 4℃离心5min，取上清液。
加入1/3体积无水乙醇，混匀，室温放置3min，12000rpm 4℃离心5min，小心倒掉上清。
- 加入无水乙醇混匀后，-20℃放置5～10分钟可提高RNA的得率。
用700μL的75%乙醇（请用DEPC-treated ddH2O配制）洗涤沉淀，12000rpm 4℃离心3min，小心倒掉上清。
重复步骤9一次。
室温倒置10min，尽可能使离心管中残留的乙醇彻底挥发。加入50μL的DEPC-treated ddH2O溶解沉淀，立即使用或-70℃长期保存.
- 如果残留的乙醇有挂壁现象，倒掉液体后再短暂离心，将残液用移液器吸出。然后开盖室温放置5～10分钟至残留的乙醇完全挥发。
- 吸取残液时注意不要将RNA沉淀取出，避免RNA损失。

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